欧盟医药产品管理法规第四卷   欧盟有关人用和兽用医药产品GMP指南   附录1  无菌药品生产   有关灭菌方面的条款摘录

 

•          原则

•          为降低微生物、微粒和热原污染的风险，无菌药品的生产应有各种特殊要求。这在很大程度上取决于生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度。质量保证极为重要，无菌药品的生产必须严格按照精心制订并经验证的方法及规程进行。产品的无菌或其它质量特性绝不能仅依赖于任何形式的最终操作或成品检验。

•          无菌药品生产所需的洁净区一般可分为4个级别：

•          A级   高风险操作区，如：灌装区，放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林瓶的区域及无菌装配/连接操作的区域。通常用层流操作台/罩来维护该区的环境状态。层流系统在其工作区域必须均匀送风，风速为0.36-0.54m/s（指导值）。应有数据证明层流的状态并须验证。在密闭的隔离操作器或手套箱内，可使用单向流或较低的风速。

•           B级   指无菌配制和灌装A级区所处的背景区域。

•           C级和D级   指生产无菌产品过程中重要程度较次的清洁操作区。

•          最终灭菌产品

28．原料和大多数产品的准备/配制至少应在D级区进行，以降低粒子和微生物污染的风险，并与过滤及灭菌操作的要求相适应。微生物污染风险比较高时，如容易长菌的产品、配制后要等相当长时间方可灭菌的产品或因故主要不在密闭容器内进行配制操作的产品，配制必须在C级环境中进行。

29．最终灭菌产品的灌装应至少在C级区进行。

30．当环境对产品污染的风险比较大时，例如灌装速度慢或容器是广口瓶、或是须暴露数秒钟后方可压塞的产品，必须在C级区内局部A级条件下灌封。软膏、霜剂、悬浊液以及乳剂一般应在C级区配制和灌封，然后作最终灭菌。

80．应监控灭菌前产品的微生物污染水平并确立控制标准，此标准与所采用灭菌方法的效果相关。必要时，还应监控热原。可能情况下，应在紧挨灌装点的位置，用除菌过滤器将所有药液，尤其是大容量注射剂进行除菌过滤。

81．无菌操作所需的物料、容器、设备和任何其它物品都应灭菌，并通过与墙密封的双扉灭菌柜进入无菌操作区，或以其它方式进入无菌操作区，但不得引入污染。非燃性气体应通过除菌过滤器进入洁净区。

82．任何新的工艺都须验证其有效性。应根据工艺及设备的实际运行情况，定期进行再验证，确认已验证的状态，或在工艺及设备有重要变更后，进行再验证。

•          灭菌

83．所有的灭菌工艺都应验证。应特别注意那些在现行的欧洲药典中没有收载的灭菌方法或者被灭菌产品不是一种简单的水溶液或油溶液时所采用灭菌方法。可能条件下，应尽量采用热力灭菌法。任何情况下，所采用的灭菌工艺必须同时获得注册和安监这个部门的认可。

 84．任何灭菌工艺在投入使用前，都必须通过物理检测手段和必要时的生物指示剂试验，来验证其对产品的适用性及灭菌效果，即每种被灭菌品的所有部位都达到了设定的灭菌要求。应对工艺的有效性定期进行再验证（一年至少一次）。设备有重要变更后，应进行再验证。应保存再验证的结果和记录。

85．所有的被灭菌品均须按规定的要求处理，以获得良好的灭菌效果，灭菌程序的设计应确保灭菌完全。

86．应通过验证确立所有灭菌程序的装载方式。

87．应将生物指示剂作为灭菌监控的补充手段。应按供货商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照试验来确认其质量。使用生物指示剂时，应采取严格措施，防止由其所致的微生物污染。

88．应当有明确区分已灭菌产品和未灭菌产品的方法。每一车（盘或其它装载设备）产品或物料均应贴签，清晰地注明品名、批号并标明是否已经灭菌。必要时，可用湿热灭菌指示带来指示一批（或一个亚批）是否已灭过菌，但事实上，灭菌指示带并不能确保该批的无菌特性。

89．每一个灭菌批次都应有灭菌记录。应把灭菌记录作为该批产品放行与否的一个依据。

•          热力灭菌

90．每次热力灭菌均应用适当大小的记录纸记录灭菌过程的时间/温度曲线。也可用具有适当精确度和准确度的其他设备记录。应通过验证确定监控和/或记录灭菌温度探头的位置。可能条件下，在验证过程中，应在同一部位安放另一支独立的测温探头作对照。

91．可使用化学或生物指示剂，但它们不得替代物理测试。

92. 应留有足够时间保证所有被灭菌品都达到设定的灭菌温度后，才开始计算灭菌时间。每种装载方式所需升温时间均须测定。

93. 在灭菌高温阶段后，应有措施防止冷却过程中已灭菌品遭受污染。任何与产品相接触的冷却用液体或气体都应当是灭过菌的，除非能证明任何渗漏的容器不可能被批准投放市场。

•          湿热灭菌

94. 湿热灭菌程序监控的参数应包括灭菌温度和压力。程序控制仪表通常应独立于监控及记录仪表。如采用自控和监测系统，该系统应经过验证，以确保符合关键工艺的要求。该系统应能记录系统本身以及工艺运行过程中出现的故障，操作人员应监控这类故障的发生。应定期将独立的温度显示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱对照。对腔室底部装有排水口的灭菌柜而言，可能需要测定并记录该点在灭菌全过程中的温度数据。如灭菌程序中包括抽真空操作，则应经常对腔室作检漏试验。

95. 被灭菌品如果不是密封容器中的产品，则应用合适的材料将其适当包扎，所用材料及包扎方式应有利于空气排放、蒸汽穿透并在灭菌后能防止污染。在规定的温度和时间内，被灭菌物品所有部位均应与灭菌剂充分接触。

96. 应注意，灭菌用蒸汽应达到适当的质量标准。蒸汽中含添加剂的量不应给产品或设备造成污染。

 

FDA Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing – Current Good Manufacturing Practice   有关灭菌方面的条款摘录

 

接触无菌产品的设备表面或无菌容器以及密封材料必须保持无菌，以保证药品不被污染。当潜在的污染出现之前，必须考虑接触无菌药品的表面的无菌程度。在无菌生产过程中，验证高污染风险设备的灭菌过程与验证药品本身、药品包装容器以及密封材料的灭菌过程是同等重要的。本文中将主要提到目前广泛被应用的两种灭菌方法，即湿热灭菌和干热灭菌。当然，在本指南提到的灭菌原则也可用于其他的灭菌方法。

对于最终灭菌产品而言，每个批次，都必须通过灭菌来保证无菌生产及其设备的无菌性。为了保证产品的无菌状态，在灭菌、运输、设备装配、容器、密封材料都必须严格符合灭菌方法要求。

1．  质量控制和验证

验证研究的目的是为了论证灭菌程序的效用。在一定的周期之后，必须进行再验证。装载产品的情况，生物指示剂以及温度探头的位置应该被记录在验证记录中。根据验证中的装载形式，用来指导并应该记录后续生产的所有批次的装载情况。

在蒸汽灭菌程序中，从灭菌腔体内去除空气是一个重要的环节。因为空气隔热的特性，使得能量不容易传递，所以其得到的热致死率比纯蒸汽要小。同时必须注意到，微生物的热抵抗能力随着不同的被灭菌的物质不同而不同。由于这个原因，在灭菌验证中，必须仔细考虑包裹生物指示剂的材料的特性和类型，以保证其具有代表性。

应该评估灭菌器或灭菌车（运用于在线灭菌）内热量难以达到的潜在点。例如，在管道内安装过滤器会导致压差的出现，这会显著的导致在下游形成温度降。我们推荐在过滤器下游使用生物指示剂。

空载验证是为了评估灭菌器内各点的均匀性（如温度、压差）。对于均匀性的研究，应该通过校验后的测量设备来完成。

热穿透研究必须在在确定灭菌装载后。在装载后的腔体内进行灭菌验证可以论证热量进入灭菌物品的效率以及确认潜在灭菌不足物品的热穿透状况。在包括最难灭菌点的装载物品中放置生物指示剂是一个确认灭菌过程效能的最直接的途径。一般来说，生物指示剂应该贴近温度探头放置，以便来评估生物热致死率与基于热输入而预测得出的热致死率之间的关系。当确定了最难灭菌的物质后，就必须特别注意过滤器、填充材料、泵的灭菌情况。此外，还必须特别注意紧紧包裹的地方、厚厚打包的物品、考虑安全而系得很紧的材料、非常长的管子、无菌过滤器、防潮湿过滤器，等等。

基本上，此类灭菌方法的循环应该基于满足最难加热点的热致死率要求。对于灭菌过程，应该评价10^－6或更好的灭菌水平。如果需要获得更多信息，不妨参考FDA指南“Guideline for the Submission of Documentation for Sterilization Process Validation in Applications for Human and Veterinary Drug Products”。

灭菌器验证程序必须时刻关注最难穿透或加热点的情况。通过质量控制、维护、变更控制、定期的周期确认来核定灭菌器的适用程度。变更控制应该充分地落实到装载形式改变或者灭菌器的变化上去。

2．  设备控制和仪器校验

对于验证和过程控制，保证依靠检测设备从灭菌周期采集来的数据的可信程度是极其重要的。检测设备应该定期检定。成文的程序应该被用来确定检测设备是否已被检定。例如，我们推荐该程序应该包括以下几点：

l         温度和压力监测设备应该在已适宜的周期内检定。验证研究中使用的探头应该在验证前、后校准。

l         在灭菌器内测量时间的装置应该定期校准。

l         应该确定生物指示剂内生物数量。生物指示剂应该在适宜环境下存放。

l         只要供应商的具有质量体系认证的资质话，在测试中，其提供的生物指示剂的D值就可以被接受。当然也可以通过培养基培养菌种（孢子条或玻璃安瓿）应该被用来确定生物指示剂的热忍耐能力（D值）。D值的确定可以通过独立的研究室来进行。

l         如果适用，也要校正测量蒸汽纯净度的仪器。

l         对于干热隧道，应该使用已经校正的测量履带的速度的仪器。生物内毒素挑战实验用品必须能在实验室内制备和标定。

为了加强过程控制，设备应该容易消毒、管道应该有倾斜设计，并有适宜的冷凝液的排放措施（如果适用）。在设备控制方面，应该在那些控制点放置测量仪器，从而可以迅捷的侦测到不可预计变化的出现。在生产程序和批次记录中应该记录使用手动控制阀或在线灭菌操作的情况和步骤。灭菌设备应该妥善维护，以保证它稳定和高效。诸如对稳定时间这种性能指标参数的定期评估，对于判断设备是否仍然保持验证时状态是非常重要的。